引言

皮肤刺激试验是评估化学物质、药品、化妆品及医疗器械等产品安全性的核心检测手段之一。通过模拟人体皮肤与测试物的接触，该试验能够预测受试物可能引发的红斑、水肿、脱屑等不良反应，从而保障产品的合规性与使用安全性。随着监管要求的趋严和“动物实验3R原则”（替代、减少、优化）的推行，皮肤刺激试验方法不断革新，逐渐形成了包含传统动物模型与体外替代技术的综合体系。本文将从检测范围、项目、方法及仪器四个维度，系统解析该领域的技术框架与应用实践。

检测范围

皮肤刺激试验广泛应用于以下领域：

• 日化产品：洗发水、护肤品、染发剂等直接接触皮肤的消费品；
• 工业化学品：清洁剂、涂料、胶黏剂等可能通过职业暴露引发皮肤刺激的原料；
• 药品与医疗器械：透皮贴剂、创面敷料、消毒剂的生物相容性评估；
• 新原料开发：化工、制药行业中新成分的毒理学筛查。

检测项目

试验的核心评估指标包括：

• 急性皮肤刺激性：单次接触后72小时内皮肤反应的严重程度；
• 腐蚀性判定：测试物是否导致不可逆组织损伤；
• 重复剂量刺激：长期接触引起的累积效应；
• 炎性介质分析：IL-1α、PGE2等细胞因子的释放水平；
• 屏障功能评估：经表皮水分流失率（TEWL）及角质层完整性变化。

检测方法

体内试验（动物模型）

传统兔皮肤刺激试验（Draize Test）依据OECD指南No.404，通过将受试物敷贴于去毛兔背皮肤，观察4小时至72小时内的红斑、水肿等反应，采用0-4分制进行定量评分。该方法因伦理争议，现仅限用于无法体外评估的高风险物质。

体外替代技术

• 重建人体表皮模型（RhE）：如EpiDerm™、SkinEthic™，通过测量细胞活性（MTT法）判断刺激性，符合OECD 439标准；
• 人工膜屏障测试：采用Corrositex®系统模拟物质穿透角质层的速率；
• 离体皮肤模型：使用人源或猪皮肤测定LDH释放量及组织病理学变化；
• 计算机预测模型：基于QSAR算法分析化学结构-活性关系。

检测仪器

• 皮肤刺激评分系统：配备高分辨率摄像头的数字化分析平台，支持红斑指数自动计算；
• TEWL测量仪：通过探针测定皮肤水分蒸发量，评估屏障损伤程度（如DermaLab®系列）；
• 多功能酶标仪：用于MTT法、LDH法及炎性因子检测（如BioTek Synergy H1）；
• 组织切片成像系统：病理样本的数字化扫描与定量分析（如Leica Aperio）；
• 体外暴露仓：可控温湿度的物质-皮肤接触模拟装置。

结论

皮肤刺激试验体系正经历从动物依赖向高精度体外模型的转型。以RhE技术为核心的替代方法已覆盖80%以上日化产品检测需求，其灵敏度与特异性经ECVAM验证达到85%-90%。未来发展方向将聚焦于器官芯片、类器官模型等多维整合技术，以及AI驱动的毒性预测平台。监管机构需加速国际标准统一化进程，而企业应建立“阶梯式评估策略”，结合计算毒理学与体外试验，实现、伦理合规的产品安全评价。

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